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阿膠的薄層鑒別與《中國藥典》權威性商討

來源: 網絡  類別:行業動態  更新時間:2010-06-24  閱讀
 阿膠系馬科動物驢Equus asinus L.的皮,經煎煮、濃縮而成的干燥膠塊,味甘、性平、入肺、肝、腎經,有滋陰補血、潤肺止血、安胎等作用,用于治療血虛萎黃、眩暈心悸、肌萎無力、心煩不眠、虛風內動、肺燥咳嗽、咯血吐血、尿血便血、崩漏、婦女月經不調、妊娠胎漏等癥。阿膠主含骨原膠,水解后得到蛋白質、氨基酸,具有滋陰補血功效。作為常用藥,阿膠自1963年收載于《中華人民共和國藥典》以來,至今各版藥典均在收錄中,且質量標準不斷完善提高,特別是在最新版本《中國藥典》2005版(Ⅰ部)藥典的標準中,增加了薄層色譜鑒別項,預示著阿膠的生產正走上標準化發展的道路。然而《中國藥典》2005版(Ⅰ部)130頁阿膠項下收錄的薄層鑒別方法,在實際操作中存在一定困難。筆者經多次實驗操作比較,體會較深。現將實驗及結果報告如下,供制定質量標準部門參考,并就阿膠的薄層鑒別方法與有關權威部門商討。 

  1 器材與方法 

  1.1 器材阿膠(東阿阿膠);硅膠(青島海洋化工廠);甘氨酸標準品(編號:7352002 中國藥品生物制品鑒定所);化學試劑均為分析純。 

  1.2 方法 

  1.2.1 取阿膠粗粉0.2 g置具塞試管中,加6 mol/L鹽酸溶液8 ml,密塞,置105℃烘箱中加熱6 h,加水6 ml,搖勻,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇10 ml使溶解,作為供試品溶液。另取甘氨酸對照品,加甲醇制成每毫升含1 mg的溶液,作為對照品溶液。照《中國藥典》2005版(附錄VI B)薄層色譜法試驗,吸取上述供試品溶液2 μl,對照品溶液1 μl,分別點樣于同一硅膠薄層板上,分別以(藥典方法)苯酚∶硼砂水(4∶1)、(經典方法)正丁醇∶冰醋酸∶乙醇∶水(4∶1∶1∶2)作為展開劑層析展開,取出、晾干,0.2%茚三酮乙醇液噴霧,105℃加熱至斑點顯色清晰。 

  1.2.2 環境條件室溫5℃,濕度85%~90%。 

  2 操作情況對比 

  2.1 展開劑的配制《中國藥典》方法:苯酚呈固體狀態,加熱取用也很不方便,加之硼砂不溶于苯酚中,故該展開系統在配制時就較為困難;經典方法:正丁醇、冰醋酸、乙醇、水在4∶1∶1∶2的比例下互溶,即配即用。 

  2.2 薄層層析展開所需時間《中國藥典》方法:7.5~8.0 h;經典方法:4.0~4.5 h。硅膠板10×20 cm,層析展開12 cm。 

  2.3 層析板晾干所需時間常溫下,《中國藥典》方法:70~80 min;經典方法:30~40 min;100℃下烘拷:《中國藥典》方法: 30~40 min;經典方法:10~15 min。 

  2.4 斑點效果0.2%茚三酮乙醇液噴霧,105℃加熱至斑點顯色清晰。兩種不同展開劑層析色譜斑點見圖1。 

  2.5 結果比較薄層實驗結果表明,同樣采取80℃下烘烤5 min處理,1與3比較,1層析展開后顯色斑點效果極好,3顯色斑點效果較差,有明顯的拖尾現象;未采取加熱處理的2與4比較,層析效果整體較差,而4拖尾現象明顯,2層析效果明顯好于4。實驗結果表明,經典方法明顯好于《中國藥典》2005年(Ⅰ部)收錄的方法。 

  1~2.展開劑:正丁醇∶冰醋酸∶乙醇∶水(4∶1∶1∶2)3~4.展開劑:苯酚∶0.5%硼砂(4∶1) 

  1、3.點樣前、點樣后硅膠板均在80℃下烘烤5 min;2、4.點樣前、點樣后硅膠板未作任何處理 

  3 討論 

  阿膠藥用始見于馬王堆漢墓出土的古醫著“五十二病方”。《神農本草經》將其列為上品,以后歷代本草均有論述,明《本草綱目》記載描述最為詳盡。隨著阿膠臨床應用研究的深入及應用范圍的不斷擴大,特別是在社會經濟發展的今天,人們更注重防治“未病”,阿膠的治療作用和保健作用并重,深受中醫藥界和人們的信賴。因此,阿膠藥用的需求量一直在不斷地增加。目前,全國有50多個阿膠生產廠家,遍及全國各地山東、河北、河南、北京、吉林、湖南、安徽、黑龍江、甘肅、內蒙、等省市。因此,制定質量標準十分必要。而在制定標準時,更應該注重實用性和實效性,為企業提供方便、快捷有效的方法。按照《中國藥典》2005年版Ⅰ部收錄的鑒別項下實驗方法操作,供試品的制備方法可行實用,茚三酮顯色科學靈敏,唯展開系統苯酚:0.5%硼砂水(4∶1)的可行性和重現性較差,在實際的操作中有一定困難。試驗結果表明,以苯酚∶0.5%硼砂水(4∶1)作為薄層色譜的展開系統,不僅溶劑的配制有困難,層析展開所需時間及晾干時間長,費時費工,而且斑點擴散,無形沒狀,多次實驗無重復性,層析結果很不穩定。筆者認為,藥品的質量標準,作為藥品生產、供應和檢驗使用的依據,其方法的選擇,應該在專屬的基礎上,盡可能提供方便、實用、靈敏,可行性和重現性較強的方法。正丁醇∶冰醋酸∶乙醇∶水(4∶1∶1∶2)作為展開系統,原本就是氨基酸的經典實驗條件,多少年來一直沿用于藥學實驗。經多次實驗對比顯示,經典的氨基酸薄層層析展開系統,同樣適合阿膠的薄層色譜檢別,以正丁醇∶冰醋酸∶乙醇∶水(4∶1∶1∶2)作為展開系統,較之《中國藥典》阿膠收錄的展開系統(苯酚∶硼砂水4∶1)具有配制方便、薄層展開時間較短、晾干較快,省工省時,而且顯色斑點集中,形狀良好,每次層析實驗結果基本相同,具有專屬、方便、實用、靈敏,重現性良好,具有較強的可行性和實用性。 
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